分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分析。常用的波長范圍為：

　　(1)200～400nm的紫外光區。

　　(2)400～760nm的可見光區。

　　(3)2.5～25μm（按波數計為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區。

　　所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度，所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定，定期進行校正檢定。

　　儀器組成

　　紫外可見光分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。

　　儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統組成。

　　光譜范圍

　　紫外可見光分光光度計包括波長范圍為400~760 nm的可見光區和波長范圍為200～400 nm的紫外光區.不同的光源都有其*的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源.

　　鎢燈的發射光譜:鎢燈光源所發出的400～760nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源.

　　氫燈（或氘燈）的發射光譜:氫燈能發出185～400 nm波長的光譜可作為紫外光光度計的光源.

　　物質的吸收光譜

　　如果在光源和棱鏡之間放上某種物質的溶液,此時在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現了幾條暗線,即光源發射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜.

　　不同物質的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質。